B16-F0小鼠黑色素瘤細胞

產品簡介
B16-F0小鼠黑色素瘤細胞培養環境：空氣，95% 。CO2，5% 37℃。

產品型號：復蘇/凍存

更新時間：2025-06-29

廠商性質：生產廠家

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細胞復蘇、傳代與凍存操作流程

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B16-F0小鼠黑色素瘤細胞

中文名稱：小鼠黑色素瘤細胞

細胞簡稱： B 16-F0

細胞形態：上皮細胞樣

生長特性：貼壁細胞

培養環境：空氣，95% 。CO2，5% 37℃

凍存條件： 55% 基礎培養基+40% FBS+5% D M SO液氮

完培： RPM I-1640(P M 150110)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)

細胞培養操作步驟：

1. 吸走多余培養基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞；

2. 吸干凈PBS后

加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養皿使胰-酶浸沒細胞表面，培養瓶放37度培養箱消化；

（細胞對于消化比較敏感，消化過度會嚴重影響細胞狀態，導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細胞*漂浮。混勻細胞時盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）

3. 加入6-8ml*培養基終止消化，輕輕吹下細胞混勻；

4. 將混勻的細胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養；

傳代比例: 不同細胞生長速度不一，具體傳代比例視細胞生長速度而定，大部分細胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細胞可以1:2傳代。

Cell cryopreservation

1.凍存液：92%*培養基+8%DMSO（可以根據實驗室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。

Tips

1. 細胞經過運輸后，部分細胞由于溫度變化及劇烈撞擊死亡破碎形成碎片，是正常現象。貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900-1000rpm(約150g)離心3min，棄上清。加5ml PBS重懸細胞，再900-1000rpm(約150g)離心3min，用新鮮的wan全培養基重懸接種到新的培養瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次。

2. 細胞生長不均時，可以將細胞消化吹散后加入新的培養基重新接種或傳代。

3.細胞生長緩慢時，可以選擇提高血清濃度培養（最高不超過20%），也可以根據細胞生長狀態，選擇傳代細胞到新的培養瓶中繼續培養。

4. 不同細胞貼壁性差異比較大，所以消化時間差別較大，20s-10min均有可能，具體以細胞消化到相互分離但未脫落，并可以輕輕吹下為準，嚴禁消化到細胞wan全漂浮。客戶消化過度導致細胞死亡、漂浮、生長緩慢，不提供免費售后服務。

5. 干冰發貨均為兩支，客戶先復蘇一支，若復蘇失敗及時聯系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶同時復蘇兩支均狀態不佳，我方不提供免費售后服務。

6. 細胞狀態正常時，應盡快凍存細胞保種，凍存后應隨機抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶凍存細胞導致死亡負責，客戶凍存細胞死亡不提供免費售后服務。

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